在步琦制備色譜系統(tǒng)使用過程中,經(jīng)常會遇到一些操作及維護(hù)問題,為使HPLC系統(tǒng)良好運行,其中一個很重要的事情就是保持系統(tǒng)的清潔。因此,應(yīng)關(guān)注流動相流經(jīng)該系統(tǒng)的所有地方,對于這些地方經(jīng)常性的沖洗。
步琦制備色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密;由于液體流動相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。HPLC應(yīng)用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領(lǐng)域。
色譜是在經(jīng)典色譜的基礎(chǔ)上,引用氣相色譜理論,從技術(shù)上將流動相改為高壓輸送的。高壓恒流泵是系統(tǒng)中至關(guān)重要的部分,下面我們來談?wù)劜界苽渖V系統(tǒng)中高壓恒流泵的保養(yǎng);
1.高壓恒流泵為整個步琦制備色譜系統(tǒng)提供了穩(wěn)定、平衡的流動相流量保證了系統(tǒng)的穩(wěn)定運行和重現(xiàn)性高壓輸液泵由步進(jìn)電機(jī)和柱塞組成,經(jīng)過長時間的高壓運行,泵的內(nèi)部結(jié)構(gòu)逐漸磨損。當(dāng)流速增大時,梯度應(yīng)增大,最好一次增加0.2mL/min,當(dāng)壓力穩(wěn)定時再增大,直至達(dá)到所需速度為止。
2.在特殊情況下,可以去除過濾頭以確定其是否被堵塞,并且可以通過注射器通過過濾頭抽吸流動相以確定其是否被堵塞。如果有堵塞,異丙醇或甲醇可用于超聲波清洗;如果清洗不成功,需要更換。
3.儀表使用后,應(yīng)及時清洗管路,清洗泵,保證泵的良好工作環(huán)境和正常使用壽命。